Electroforeza hemoglobinei este o tehnică de laborator utilizată pentru separarea și identificarea diferitelor tipuri de hemoglobine prezente în sânge. Hemoglobina este o proteină prezentă în interiorul globulelor roșii și are un rol crucial în transportul oxigenului către țesuturi. Variantele genetice sau mutațiile în genele hemoglobinei pot duce la apariția hemoglobinopatiilor, cum ar fi anemia falciformă sau talasemia. Electroforeza hemoglobinei este esențială pentru diagnosticul și monitorizarea acestor afecțiuni.
Principii ale electroforezei hemoglobinei
Electroforeza hemoglobinei se bazează pe principiul separării moleculelor în funcție de mobilitatea lor într-un câmp electric. Hemoglobinele au diferite încărcări electrice datorită variațiilor structurale ale lanțurilor polipeptidice și a conținutului lor de fier.
Prin aplicarea unui câmp electric la un gel sau un suport special, hemoglobinele migrează în funcție de încărcarea lor electrică și dimensiunea moleculară. Astfel, ele pot fi separate în funcție de mobilitatea lor și pot fi detectate și identificate în baza acestor caracteristici.
Metode de electroforeză hemoglobinică
Există două metode principale de electroforeză hemoglobinică: electroforeza pe gel de agaroz și electroforeza capilară. Ambele metode au avantaje și limitări, dar scopul lor este același: separarea și identificarea hemoglobinelor.
- Electroforeza pe gel de agaroz:
- Acesta este unul dintre cele mai comune metode utilizate în laboratoarele de analize medicale.
- Gelul de agaroz este utilizat pentru a separa hemoglobinele în funcție de dimensiunea lor.
- Sângele pacientului este amestecat cu un tampon care ajută la menținerea stabilității pH-ului și a încărcărilor electrice.
- Miezul gelului este tăiat sub formă de piste în care se aplică sângele tratat.
- Când este aplicat un câmp electric, hemoglobinele migrează în gel în funcție de dimensiunea lor și încărcarea electrică.
- După separare, hemoglobinele sunt fixate și pot fi vizualizate prin colorare cu o soluție specifică.
- Electroforeza capilară:
- Această metodă este mai rapidă și mai automatizată decât electroforeza pe gel de agaroz.
- Utilizează un capilar îngust în care sângele pacientului este introdus.
- O tensiune electrică este aplicată pentru a face ca hemoglobinele să migreze în capilar.
- Hemoglobinele sunt detectate pe măsură ce trec prin detectori optici.
- Datele obținute sunt procesate de un software specializat pentru identificarea tipurilor de hemoglobine.
Interpretarea rezultatelor
Interpretarea rezultatelor electroforezei hemoglobinei necesită cunoașterea tipurilor de hemoglobine și a modificărilor lor structurale. În general, rezultatele sunt prezentate sub formă de grafic sau profil electroforetic, care arată migrația diferitelor hemoglobine în funcție de mobilitatea lor în câmpul electric. Iată câteva puncte importante de luat în considerare în interpretarea rezultatelor:
- Hemoglobine normale: Un profil electroforetic normal va arăta prezența hemoglobinei A (HbA) ca vârf principal. HbA este hemoglobina predominantă la adulți și transportă eficient oxigenul.
- Hemoglobine anormale: Variantele de hemoglobină anormală vor apărea ca vârfuri distincte în profil. De exemplu, anemia falciformă poate fi identificată prin prezența hemoglobinei S (HbS) în loc de HbA.
- Interpretarea calitativă: În plus de identificarea tipurilor de hemoglobine, electroforeza poate oferi informații calitative despre prezența sau absența unor hemoglobine anormale.
- Cantificarea: În unele cazuri, electroforeza poate fi utilizată pentru a determina proporția relativă a diferitelor tipuri de hemoglobine din sânge.
Electroforeza hemoglobinei este o tehnică importantă pentru diagnosticul și monitorizarea afecțiunilor hematologice, în special a hemoglobinopatiilor. Prin separarea și identificarea hemoglobinelor din sânge, medicii pot stabili un diagnostic precis și pot dezvolta un plan de tratament adecvat. Cu ajutorul electroforezei hemoglobinei, este posibilă identificarea variantelor genetice ale hemoglobinei, ceea ce poate fi crucial în gestionarea bolilor hematologice.
